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		<title>5yeq - Revision history</title>
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		<title>OCA at 08:28, 22 November 2023</title>
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		<title>OCA at 09:17, 21 October 2020</title>
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		<title>OCA at 07:09, 4 July 2018</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Ketol-acid reductoisomerase (KARI) is a bifunctional enzyme in the second step of branched-chain amino acids biosynthetic pathway. Most KARIs prefer NADPH as a cofactor. However, KARI with a preference for NADH is desirable in industrial applications including anaerobic fermentation for the production of branched-chain amino acids or biofuels. Here, we characterize a thermoacidophilic archaeal Sac-KARI from Sulfolobus acidocaldarius and present its crystal structure at a 1.75-A resolution. By comparison with other holo-KARI structures, one sulphate ion is observed in each binding site for the 2'-phosphate of NADPH, implicating its NADPH preference. Sac-KARI has very high affinity for NADPH and NADH, with K M values of 0.4 muM for NADPH and 6.0 muM for NADH, suggesting that both are good cofactors at low concentrations although NADPH is favoured over NADH. Furthermore, Sac-KARI can catalyze 2(S)-acetolactate (2S-AL) with either cofactor from 25 to 60 degrees C, but the enzyme has higher activity by using NADPH. In addition, the catalytic activity of Sac-KARI increases significantly with elevated temperatures and reaches an optimum at 60 degrees C. Bi-cofactor utilization and the thermoactivity of Sac-KARI make it a potential candidate for use in metabolic engineering or industrial applications under anaerobic or harsh conditions.&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Authors: Ko, T.P&lt;/del&gt;., Chen, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;C.Y.&lt;/del&gt;, Lin&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, K.F.&lt;/del&gt;, Lin&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, B.L.&lt;/del&gt;, Huang&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, C.H.&lt;/del&gt;, Chiang&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, C.H.&lt;/del&gt;, Horng&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, J&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;C&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, Tsai, M&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;D&lt;/del&gt;.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;NADH/NADPH bi-cofactor-utilizing and thermoactive ketol-acid reductoisomerase from Sulfolobus acidocaldarius&lt;/ins&gt;.,Chen &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;CY&lt;/ins&gt;, &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Ko TP&lt;/ins&gt;, Lin &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;KF&lt;/ins&gt;, Lin &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;BL&lt;/ins&gt;, Huang &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;CH&lt;/ins&gt;, Chiang &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;CH&lt;/ins&gt;, Horng &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;JC Sci Rep&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;2018 May 8;8(1):7176&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;doi: 10&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;1038/s41598-018-25361-4&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;PMID:29739976&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:29739976&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[Category: &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Unreleased Structures&lt;/del&gt;]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;&amp;lt;/div&amp;gt;&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[Category: &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Lin&lt;/del&gt;, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;B.L&lt;/del&gt;]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;== References ==&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[Category: &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Horng&lt;/del&gt;, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;J.C&lt;/del&gt;]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;__TOC__&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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		<title>OCA: New page: '''Unreleased structure'''  The entry 5yeq is ON HOLD  until Paper Publication  Authors: Ko, T.P., Chen, C.Y., Lin, K.F., Lin, B.L., Huang, C.H., Chiang, C.H., Horng, J.C., Tsai, M.D.  Des...</title>
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				<updated>2017-09-27T16:28:54Z</updated>
		
		<summary type="html">&lt;p&gt;New page: '''Unreleased structure'''  The entry 5yeq is ON HOLD  until Paper Publication  Authors: Ko, T.P., Chen, C.Y., Lin, K.F., Lin, B.L., Huang, C.H., Chiang, C.H., Horng, J.C., Tsai, M.D.  Des...&lt;/p&gt;
&lt;p&gt;&lt;b&gt;New page&lt;/b&gt;&lt;/p&gt;&lt;div&gt;'''Unreleased structure'''&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
The entry 5yeq is ON HOLD  until Paper Publication&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
Authors: Ko, T.P., Chen, C.Y., Lin, K.F., Lin, B.L., Huang, C.H., Chiang, C.H., Horng, J.C., Tsai, M.D.&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
Description: The structure of Sac-KARI protein&lt;br /&gt;
[[Category: Unreleased Structures]]&lt;br /&gt;
[[Category: Ko, T.P]]&lt;br /&gt;
[[Category: Lin, B.L]]&lt;br /&gt;
[[Category: Huang, C.H]]&lt;br /&gt;
[[Category: Horng, J.C]]&lt;br /&gt;
[[Category: Lin, K.F]]&lt;br /&gt;
[[Category: Chen, C.Y]]&lt;br /&gt;
[[Category: Tsai, M.D]]&lt;br /&gt;
[[Category: Chiang, C.H]]&lt;/div&gt;</summary>
		<author><name>OCA</name></author>	</entry>

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