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		<title>1rgk - Revision history</title>
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			<title>OCA at 08:23, 1 May 2024</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;On the basis of molecular dynamics and free-energy perturbation approaches, the Glu46Gln (E46Q) mutation in the guanine-specific ribonuclease T1 (RNase T1) was predicted to render the enzyme specific for adenine. The E46Q mutant was genetically engineered and characterized biochemically and crystallographically by investigating the structures of its two complexes with 2'AMP and 2'GMP. The ribonuclease E46Q mutant is nearly inactive towards dinucleoside phosphate substrates but shows 17% residual activity towards RNA. It binds 2'AMP and 2'GMP equally well with dissociation constants of 49 microM and 37 microM, in contrast to the wild-type enzyme, which strongly discriminates between these two nucleotides, yielding dissociation constants of 36 microM and 0.6 microM. These data suggest that the E46Q mutant binds the nucleotides not to the specific recognition site but to the subsite at His92. This was confirmed by the crystal structures, which also showed that the Gln46 amide is hydrogen bonded to the Phe100 N and O atoms, and tightly anchored in this position. This interaction may either have locked the guanine recognition site so that 2'AMP and 2'GMP are unable to insert, or the contribution to guanine recognition of Glu46 is so important that the E46Q mutant is unable to function in recognition of either guanine and adenine.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;RNase T1 mutant Glu46Gln binds the inhibitors 2'GMP and 2'AMP at the 3' subsite.,Granzin J, Puras-Lutzke R, Landt O, Grunert HP, Heinemann U, Saenger W, Hahn U J Mol Biol. 1992 May 20;225(2):533-42. PMID:1350642&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:1350642&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;From MEDLINE&amp;amp;reg;/PubMed&amp;amp;reg;, a database of the U.S. National Library of Medicine.&amp;lt;br&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&amp;lt;/div&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&amp;lt;div class=&amp;quot;pdbe-citations 1rgk&amp;quot; style=&amp;quot;background-color:#fffaf0;&amp;quot;&amp;gt;&amp;lt;/div&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;==See Also==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;==See Also==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;*[[Ribonuclease 3D structures|Ribonuclease 3D structures]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;*[[Ribonuclease 3D structures|Ribonuclease 3D structures]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 15 Sep 2021 10:13:07 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 11:29, 4 December 2019</title>
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			<pubDate>Wed, 04 Dec 2019 11:29:13 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 06:54, 29 November 2017</title>
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			<pubDate>Wed, 29 Nov 2017 06:54:57 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 15:11, 9 February 2016</title>
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			<pubDate>Tue, 09 Feb 2016 15:11:33 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 23:27, 10 September 2015</title>
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			<pubDate>Thu, 10 Sep 2015 23:27:36 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 08:05, 6 January 2015</title>
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			<pubDate>Tue, 06 Jan 2015 08:05:05 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA at 20:21, 28 September 2014</title>
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			<pubDate>Sun, 28 Sep 2014 20:21:29 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
		<item>
			<title>OCA at 14:15, 20 October 2012</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=1rgk&amp;diff=1566373&amp;oldid=prev</link>
			<description>&lt;p&gt;&lt;/p&gt;

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			<pubDate>Sat, 20 Oct 2012 14:15:50 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;1rgk&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=1rgk&amp;diff=1468657&amp;oldid=prev</link>
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		&lt;/table&gt;</description>
			<pubDate>Thu, 26 Jul 2012 14:34:48 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:1rgk</comments>		</item>
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