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		<title>2a0w - Revision history</title>
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			<title>OCA at 07:17, 23 August 2023</title>
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			<pubDate>Wed, 23 Aug 2023 07:17:22 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA at 08:23, 27 January 2021</title>
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			<title>OCA at 07:25, 9 May 2018</title>
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			<pubDate>Wed, 09 May 2018 07:25:11 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
		<item>
			<title>OCA at 21:15, 11 September 2015</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=2a0w&amp;diff=2482459&amp;oldid=prev</link>
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			<pubDate>Fri, 11 Sep 2015 21:15:25 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:41, 8 January 2015</title>
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			<pubDate>Thu, 08 Jan 2015 10:41:03 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA at 01:23, 30 September 2014</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=2a0w&amp;diff=2020939&amp;oldid=prev</link>
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&lt;tr&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;The X-ray crystal structures of human purine nucleoside phosphorylase (PNP) with bound inosine or transition-state analogues show His257 within hydrogen bonding distance of the 5'-hydroxyl. The mutants His257Phe, His257Gly, and His257Asp exhibited greatly decreased affinity for Immucillin-H (ImmH), binding this mimic of an early transition state as much as 370-fold (Km/Ki) less tightly than native PNP. In contrast, these mutants bound DADMe-ImmH, a mimic of a late transition state, nearly as well as the native enzyme. These results indicate that His257 serves an important role in the early stages of transition-state formation. Whereas mutation of His257 resulted in little variation in the PNP x DADMe-ImmH x SO4 structures, His257Phe x ImmH x PO4 showed distortion at the 5'-hydroxyl, indicating the importance of H-bonding in positioning this group during progression to the transition state. Binding isotope effect (BIE) and kinetic isotope effect (KIE) studies of the remote 5'-(3)H for the arsenolysis of inosine with native PNP revealed a BIE of 1.5% and an unexpectedly large intrinsic KIE of 4.6%. This result is interpreted as a moderate electronic distortion toward the transition state in the Michaelis complex with continued development of a similar distortion at the transition state. The mutants His257Phe, His257Gly, and His257Asp altered the 5'-(3)H intrinsic KIE to -3, -14, and 7%, respectively, while the BIEs contributed 2, 2, and -2%, respectively. These surprising results establish that forces in the Michaelis complex, reported by the BIEs, can be reversed or enhanced at the transition state.&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;[[http://www.uniprot.org/uniprot/PNPH_HUMAN PNPH_HUMAN]] Defects &lt;/del&gt;in &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;PNP are &lt;/del&gt;the &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;cause &lt;/del&gt;of purine nucleoside phosphorylase &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;deficiency &lt;/del&gt;(&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;PNPD&lt;/del&gt;) &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;[MIM&lt;/del&gt;:&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;[http://omim&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;org/entry/613179 613179]]&lt;/del&gt;. &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;It leads to a severe T-cell immunodeficiency with neurologic disorder in children.&amp;lt;ref&amp;gt;&lt;/del&gt;PMID:&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;3029074&amp;lt;/ref&amp;gt;&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:1384322&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/del&gt;&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;8931706&lt;/del&gt;&amp;lt;/ref&amp;gt; &lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Tue, 30 Sep 2014 01:23:48 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA at 00:47, 25 March 2013</title>
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			<pubDate>Mon, 25 Mar 2013 00:47:53 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;2a0w&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
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			<pubDate>Sun, 06 Jan 2013 10:38:39 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
		<item>
			<title>OCA at 10:38, 6 January 2013</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=2a0w&amp;diff=1665163&amp;oldid=prev</link>
			<description>&lt;p&gt;&lt;/p&gt;

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&lt;/table&gt;</description>
			<pubDate>Sun, 06 Jan 2013 10:38:36 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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			<title>OCA at 12:14, 3 March 2010</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=2a0w&amp;diff=1051649&amp;oldid=prev</link>
			<description>&lt;p&gt;&lt;/p&gt;

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&lt;tr&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&amp;#160;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 03 Mar 2010 12:14:21 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2a0w</comments>		</item>
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