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		<title>2ev3 - Revision history</title>
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			<title>OCA at 13:50, 13 March 2024</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;The universal secondary messenger cAMP is produced by adenylyl cyclases (ACs). Most bacterial and all eukaryotic ACs belong to class III of six divergent classes. A class III characteristic is formation of the catalytic pocket at a dimer interface and the presence of additional regulatory domains. Mycobacterium tuberculosis possesses 15 class III ACs, including Rv1264, which is activated at acidic pH due to pH-dependent structural transitions of the Rv1264 dimer. It has been shown by X-ray crystallography that the N-terminal regulatory and C-terminal catalytic domains of Rv1264 interact in completely different ways in the active and inhibited states. Here, we report an in-depth structural and functional analysis of the regulatory domain of Rv1264. The 1.6 A resolution crystal structure shows the protein in a tight, disk-shaped dimer, formed around a helical bundle, and involving a protein chain crossover. To understand pH regulation, we determined structures at acidic and basic pH values and employed structure-based mutagenesis in the holoenzyme to elucidate regulation using an AC activity assay. It has been shown that regulatory and catalytic domains must be linked in a single protein chain. The new studies demonstrate that the length of the linker segment is decisive for regulation. Several amino acids on the surface of the regulatory domain, when exchanged, altered the pH-dependence of AC activity. However, these residues are not conserved amongst a number of related ACs. The closely related mycobacterial Rv2212, but not Rv1264, is strongly activated by the addition of fatty acids. The structure resolved the presence of a deeply embedded fatty acid, characterised as oleic acid by mass spectrometry, which may serve as a hinge. From these data, we conclude that the regulatory domain is a structural scaffold used for distinct regulatory purposes.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 13 Mar 2024 13:50:15 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 12:30, 10 February 2021</title>
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			<pubDate>Wed, 10 Feb 2021 12:30:42 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 06:26, 9 February 2016</title>
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			<pubDate>Tue, 09 Feb 2016 06:26:30 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 19:29, 10 September 2015</title>
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			<pubDate>Thu, 10 Sep 2015 19:29:33 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 05:01, 25 December 2014</title>
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			<pubDate>Thu, 25 Dec 2014 05:01:48 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 04:42, 29 September 2014</title>
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			<pubDate>Mon, 29 Sep 2014 04:42:38 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 12:57, 20 October 2012</title>
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			<pubDate>Sat, 20 Oct 2012 12:57:34 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:27, 26 July 2012</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=2ev3&amp;diff=1461895&amp;oldid=prev</link>
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			<pubDate>Thu, 26 Jul 2012 10:27:46 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;2ev3&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
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			<pubDate>Mon, 27 Dec 2010 00:18:38 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:2ev3</comments>		</item>
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