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		<title>3qxw - Revision history</title>
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			<title>OCA at 09:52, 25 December 2019</title>
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			<pubDate>Wed, 25 Dec 2019 09:52:54 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:37, 13 February 2019</title>
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			<pubDate>Thu, 04 Aug 2016 12:49:57 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:47, 19 December 2014</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=3qxw&amp;diff=2129315&amp;oldid=prev</link>
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&lt;tr&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Conventional anti-hapten antibodies typically bind low-molecular weight compounds (haptens) in the crevice between the variable heavy and light chains. Conversely, heavy chain-only camelid antibodies, which lack a light chain, must rely entirely on a single variable domain to recognize haptens. While several anti-hapten VHHs have been generated, little is known regarding the underlying structural and thermodynamic basis for hapten recognition. Here, an anti-methotrexate VHH (anti-MTX VHH) was generated using grafting methods whereby the three complementarity determining regions (CDRs) were inserted onto an existing VHH framework. Thermodynamic analysis of the anti-MTX VHH CDR1-3 Graft revealed a micromolar binding affinity, while the crystal structure of the complex revealed a somewhat surprising noncanonical binding site which involved MTX tunneling under the CDR1 loop. Due to the close proximity of MTX to CDR4, a nonhypervariable loop, the CDR4 loop sequence was subsequently introduced into the CDR1-3 graft, which resulted in a dramatic 1000-fold increase in the binding affinity. Crystal structure analysis of both the free and complex anti-MTX CDR1-4 graft revealed CDR4 plays a significant role in both intermolecular contacts and binding site conformation that appear to contribute toward high affinity binding. Additionally, the anti-MTX VHH possessed relatively high specificity for MTX over closely related compounds aminopterin and folate, demonstrating that VHH domains are capable of binding low-molecular weight ligands with high affinity and specificity, despite their reduced interface.&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;==About this Structure==&lt;/del&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;An anti-hapten camelid antibody reveals &lt;/ins&gt;a &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;cryptic binding site &lt;/ins&gt;with &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;significant energetic contributions &lt;/ins&gt;from &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;a nonhypervariable loop&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;,Fanning SW, Horn JR Protein Sci&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;2011 Jul;20(7):1196-207&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;doi&lt;/ins&gt;: &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;10.1002&lt;/ins&gt;/&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;pro&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;648&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Epub 2011 May, 23&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;PMID:21557375&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:21557375&amp;lt;&lt;/ins&gt;/&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;ref&amp;gt;&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Fri, 19 Dec 2014 10:47:44 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 04:12, 12 September 2013</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=3qxw&amp;diff=1840350&amp;oldid=prev</link>
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			<pubDate>Thu, 12 Sep 2013 04:12:14 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 06:06, 27 July 2011</title>
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			<pubDate>Wed, 27 Jul 2011 06:06:45 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 04:18, 12 May 2011</title>
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			<pubDate>Thu, 12 May 2011 04:18:34 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA at 06:47, 23 March 2011</title>
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			<pubDate>Wed, 23 Mar 2011 06:47:32 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;3qxw&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
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			<description>&lt;p&gt;Protected &amp;quot;&lt;a href=&quot;/wiki/index.php/3qxw&quot; title=&quot;3qxw&quot;&gt;3qxw&lt;/a&gt;&amp;quot; [edit=sysop:move=sysop]&lt;/p&gt;

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			&lt;/tr&gt;
		&lt;/table&gt;</description>
			<pubDate>Wed, 09 Mar 2011 06:10:36 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:3qxw</comments>		</item>
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