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		<title>4ff3 - Revision history</title>
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			<title>OCA at 11:15, 1 March 2024</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;The challenge for structural biology is to understand atomic-level macromolecular motions during enzymatic reaction (1-3). X-ray crystallography can reveal high-resolution structures; however, one perceived limitation is that it reveals only static views. Here we use time-dependent soak-trigger-freeze X-ray crystallography, namely, soaking nucleotide and divalent metal into the bacteriophage RNA polymerase (RNAP)-promoter DNA complex crystals to trigger the nucleotidyl transfer reaction and freezing crystals at different time points, to capture real-time intermediates in the pathway of transcription. In each crystal structure, different intensities and shapes of electron density maps corresponding to the nucleotide and metal were revealed at the RNAP active site that allow watching the nucleotide and metal bindings and the phosphodiester bond formation in a time perspective. Our study provides temporal order of substrate assembly and metal co-factor binding at the active site of enzyme that completes our understanding of the two-metal-ion mechanism (4-6) and fidelity mechanism in single-subunit RNAPs. The nucleotide binding metal (MeB) is coordinated at the active site prior to the catalytic metal (MeA). MeA coordination is only temporal, established just before and dissociated immediately after phosphodiester bond formation. We captured these elusive intermediates exploiting the slow enzymatic reaction in crystallo. These results demonstrate that the simple time-dependent soak-trigger-freeze X-ray crystallography offers a direct means for monitoring enzymatic reactions.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Fri, 01 Mar 2024 11:15:52 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 04:53, 7 October 2022</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;== Structural highlights ==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;== Structural highlights ==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Fri, 07 Oct 2022 04:53:20 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 08:26, 27 March 2019</title>
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			<pubDate>Wed, 27 Mar 2019 08:26:34 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 16:45, 11 August 2016</title>
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			<pubDate>Thu, 11 Aug 2016 16:45:50 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:59, 20 January 2015</title>
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			<pubDate>Tue, 20 Jan 2015 10:59:00 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 13:04, 20 February 2013</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=4ff3&amp;diff=1723674&amp;oldid=prev</link>
			<description>&lt;p&gt;&lt;/p&gt;

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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[4ff3]] is a 4 chain structure with sequence from [http://en.wikipedia.org/wiki/Escherichia_phage_n4 Escherichia phage n4]. Full crystallographic information is available from [http://oca.weizmann.ac.il/oca-bin/ocashort?id=4FF3 OCA]. &lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[4ff3]] is a 4 chain structure with sequence from [http://en.wikipedia.org/wiki/Escherichia_phage_n4 Escherichia phage n4]. Full crystallographic information is available from [http://oca.weizmann.ac.il/oca-bin/ocashort?id=4FF3 OCA]. &lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 20 Feb 2013 13:04:06 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 11:51, 23 January 2013</title>
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			<pubDate>Wed, 23 Jan 2013 11:51:14 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 21:26, 12 December 2012</title>
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			<pubDate>Wed, 12 Dec 2012 21:26:06 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<pubDate>Wed, 05 Dec 2012 10:23:43 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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			<title>OCA at 05:18, 15 August 2012</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=4ff3&amp;diff=1522673&amp;oldid=prev</link>
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			<pubDate>Wed, 15 Aug 2012 05:18:25 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4ff3</comments>		</item>
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