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		<title>4zlf - Revision history</title>
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			<title>OCA at 09:05, 20 March 2024</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;The microbial oxidative cellulose degradation system is attracting significant research attention after the recent discovery of lytic polysaccharide mono-oxygenases. A primary product of the oxidative and hydrolytic cellulose degradation system is cellobionic acid (CbA), the aldonic acid form of cellobiose. We previously demonstrated that the intracellular enzyme belonging to glycoside hydrolase (GH) family 94 from cellulolytic fungus and bacterium is cellobionic acid phosphorylase (CBAP), which catalyzes reversible phosphorolysis of CbA into glucose 1-phosphate and gluconic acid (GlcA). In this report we describe the biochemical characterization and the three-dimensional structure of CBAP from the marine cellulolytic bacterium Saccharophagus degradans. Structures of ligand-free and complex forms with CbA, GlcA, and a synthetic disaccharide product from glucuronic acid (GlcUA) were determined at resolutions of up to 1.6 A. The active site is located near the dimer interface. At subsite +1, the carboxylate group of GlcA and CbA is recognized by Arg-609 and Lys-613. Additionally, one residue from the neighboring protomer (Gln-190) is involved in the carboxylate recognition of GlcA. A mutational analysis indicated that these residues are critical for the binding and catalysis of the aldonic and uronic acid acceptors GlcA and GlcUA. Structural and sequence comparisons with other GH94 phosphorylases revealed that CBAPs have a unique subsite +1 with a distinct amino acid residue conservation pattern at this site. This study provides molecular insight into the energetically efficient metabolic pathway of oxidized sugars that links the oxidative cellulolytic pathway to the glycolytic and pentose phosphate pathways in cellulolytic microbes.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 20 Mar 2024 09:05:00 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 07:32, 18 May 2023</title>
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			<pubDate>Thu, 18 May 2023 07:32:23 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 07:57, 26 June 2019</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=4zlf&amp;diff=3060734&amp;oldid=prev</link>
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			<pubDate>Wed, 26 Jun 2019 07:57:29 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 13:20, 10 May 2017</title>
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			<pubDate>Wed, 10 May 2017 13:20:38 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 08:29, 17 June 2015</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;== Publication Abstract from PubMed ==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt; &lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #eee; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;== Publication Abstract from PubMed ==&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;A &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;novel phosphorylase was characterized as new member &lt;/del&gt;of glycoside hydrolase family 94 from &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;the &lt;/del&gt;cellulolytic &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;bacterium Xanthomonas campestris and the &lt;/del&gt;fungus &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Neurospora crassa. The enzyme catalyzed &lt;/del&gt;reversible phosphorolysis of &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;cellobionic acid. We propose 4-O-beta-D-glucopyranosyl-D&lt;/del&gt;-gluconic acid&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;: phosphate alpha-D-glucosyltransferase as &lt;/del&gt;the &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;systematic name &lt;/del&gt;and &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;cellobionic acid phosphorylase as &lt;/del&gt;the &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;short names for the novel enzyme. Several cellulolytic fungi &lt;/del&gt;of the &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;phylum Ascomycota also possess homologous proteins&lt;/del&gt;. &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;We&lt;/del&gt;, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;therefore&lt;/del&gt;, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;suggest that the enzyme plays &lt;/del&gt;a &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;crucial role in cellulose degradation where cellobionic acid as oxidized cellulolytic &lt;/del&gt;product is &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;converted into alpha-D-glucose &lt;/del&gt;1-&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;phosphate &lt;/del&gt;and &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;D&lt;/del&gt;-&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;gluconic &lt;/del&gt;acid &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;to enter glycolysis &lt;/del&gt;and the pentose phosphate &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;pathway, respectively&lt;/del&gt;.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;The microbial oxidative cellulose degradation system is attracting significant research attention after the recent discovery of lytic polysaccharide mono-oxygenases. &lt;/ins&gt;A &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;primary product &lt;/ins&gt;of &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;the oxidative and hydrolytic cellulose degradation system is cellobionic acid (CbA), the aldonic acid form of cellobiose. We previously demonstrated that the intracellular enzyme belonging to &lt;/ins&gt;glycoside hydrolase &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;(GH) &lt;/ins&gt;family 94 from cellulolytic fungus &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;and bacterium is cellobionic acid phosphorylase (CBAP), which catalyzes &lt;/ins&gt;reversible phosphorolysis of &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;CbA into glucose 1&lt;/ins&gt;-&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;phosphate and &lt;/ins&gt;gluconic acid &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;(GlcA). In this report we describe &lt;/ins&gt;the &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;biochemical characterization &lt;/ins&gt;and the &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;three-dimensional structure &lt;/ins&gt;of &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;CBAP from &lt;/ins&gt;the &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;marine cellulolytic bacterium Saccharophagus degradans&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Structures of ligand-free and complex forms with CbA&lt;/ins&gt;, &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;GlcA&lt;/ins&gt;, &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;and &lt;/ins&gt;a &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;synthetic disaccharide &lt;/ins&gt;product &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;from glucuronic acid (GlcUA) were determined at resolutions of up to 1.6 A. The active site &lt;/ins&gt;is &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;located near the dimer interface. At subsite +&lt;/ins&gt;1&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, the carboxylate group of GlcA and CbA is recognized by Arg&lt;/ins&gt;-&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;609 &lt;/ins&gt;and &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Lys&lt;/ins&gt;-&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;613. Additionally, one residue from the neighboring protomer (Gln-190) is involved in the carboxylate recognition of GlcA. A mutational analysis indicated that these residues are critical for the binding and catalysis of the aldonic and uronic &lt;/ins&gt;acid &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;acceptors GlcA &lt;/ins&gt;and &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;GlcUA. Structural and sequence comparisons with other GH94 phosphorylases revealed that CBAPs have a unique subsite +1 with a distinct amino acid residue conservation pattern at this site. This study provides molecular insight into &lt;/ins&gt;the &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;energetically efficient metabolic pathway of oxidized sugars that links the oxidative cellulolytic pathway to the glycolytic and &lt;/ins&gt;pentose phosphate &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;pathways in cellulolytic microbes&lt;/ins&gt;.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Discovery &lt;/del&gt;of cellobionic acid phosphorylase in &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;cellulolytic bacteria and fungi&lt;/del&gt;.,Nihira T, Saito Y&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, Nishimoto M&lt;/del&gt;, Kitaoka M&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, Igarashi K, Ohtsubo K&lt;/del&gt;, Nakai H &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;FEBS Lett&lt;/del&gt;. &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;2013 Nov 1;587(21):3556-61&lt;/del&gt;. &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;doi&lt;/del&gt;: &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;10&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;1016/j&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;febslet.2013.09.014. Epub, 2013 Sep 19&lt;/del&gt;. PMID:&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;24055472&lt;/del&gt;&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;24055472&lt;/del&gt;&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Crystal structure and substrate recognition &lt;/ins&gt;of cellobionic acid phosphorylase &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;playing a key role &lt;/ins&gt;in &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;oxidative cellulose degradation by microbes&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;,Nam YW&lt;/ins&gt;, Nihira &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;T, Arakawa &lt;/ins&gt;T, Saito Y, Kitaoka M, Nakai H&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;, Fushinobu S J Biol Chem&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;2015 Jun 3&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;pii&lt;/ins&gt;: &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;jbc&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;M115&lt;/ins&gt;.&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;664664&lt;/ins&gt;. PMID:&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;26041776&lt;/ins&gt;&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;26041776&lt;/ins&gt;&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 17 Jun 2015 08:29:29 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 13:57, 10 June 2015</title>
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			<pubDate>Wed, 10 Jun 2015 13:57:38 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:52, 20 May 2015</title>
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			<pubDate>Wed, 20 May 2015 10:52:10 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;4zlf&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
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			<description>&lt;p&gt;Protected &amp;quot;&lt;a href=&quot;/wiki/index.php/4zlf&quot; title=&quot;4zlf&quot;&gt;4zlf&lt;/a&gt;&amp;quot; [edit=sysop:move=sysop]&lt;/p&gt;

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			<pubDate>Wed, 13 May 2015 11:05:23 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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			<title>OCA: New page: '''Unreleased structure'''  The entry 4zlf is ON HOLD   Authors: Nam, Y.W., Arakawa, T., Fushinobu, S.  Description:  Category: Unreleased Structures Category: Fushinobu, S [[Categ...</title>
			<link>http://52.214.119.220/wiki/index.php?title=4zlf&amp;diff=2402843&amp;oldid=prev</link>
			<description>&lt;p&gt;New page: '''Unreleased structure'''  The entry 4zlf is ON HOLD   Authors: Nam, Y.W., Arakawa, T., Fushinobu, S.  Description:  &lt;a href=&quot;/wiki/index.php/Category:Unreleased_Structures&quot; title=&quot;Category:Unreleased Structures&quot;&gt;Category: Unreleased Structures&lt;/a&gt; &lt;a href=&quot;/wiki/index.php/Category:Fushinobu%2C_S&quot; title=&quot;Category:Fushinobu, S&quot;&gt;Category: Fushinobu, S&lt;/a&gt; [[Categ...&lt;/p&gt;
&lt;p&gt;&lt;b&gt;New page&lt;/b&gt;&lt;/p&gt;&lt;div&gt;'''Unreleased structure'''&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
The entry 4zlf is ON HOLD &lt;br /&gt;
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Authors: Nam, Y.W., Arakawa, T., Fushinobu, S.&lt;br /&gt;
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[[Category: Unreleased Structures]]&lt;br /&gt;
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[[Category: Nam, Y.W]]&lt;br /&gt;
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			<pubDate>Wed, 13 May 2015 11:05:21 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:4zlf</comments>		</item>
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