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		<title>5nhe - Revision history</title>
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			<title>OCA at 07:27, 1 May 2024</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;Xylose isomerase from Piromyces sp. E2 (PirXI) can be used for equipping Saccharomyces cerevisiae with the capacity to ferment xylose to ethanol. The biochemical properties and structure of the enzyme have not been described even though its metal content, catalytic parameters and expression level are critical for rapid xylose utilization. We have isolated the enzyme after high-level expression in E. coli, analyzed the metal-dependence of its catalytic properties and solved twelve crystal structures in the presence of different metals, substrates, and substrate analogs. The activity assays revealed that various bivalent metals can activate PirXI for xylose isomerization. Among these metals, Mn2+ is the most favorable for catalytic activity. Furthermore, the enzyme shows the highest affinity for Mn2+ which was established by measuring the activation constants (Kact) for different metals. Metal analysis of the purified enzyme showed that in vivo the enzyme binds a mixture of metals which is determined by metal availability as well as the affinity, indicating that native metal composition can influence activity. The crystal structures show the presence of an active site similar to that of other xylose isomerases, with a D-xylose binding site containing two tryptophans and a catalytic histidine, as well as two metal binding sites that are formed by carboxylate groups of conserved aspartates and glutamates. The binding positions and conformations of the metal-coordinating residues varied slightly for different metals, which is hypothesized to contribute to the observed metal-dependence of the isomerase activity.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;Metal-dependence of xylose isomerase from Piromyces sp. E2 explored by activity profiling and protein crystallography.,Lee M, Rozeboom HJ, de Waal P, de Jong R, Dudek HM, Janssen DB Biochemistry. 2017 Oct 18. doi: 10.1021/acs.biochem.7b00777. PMID:29045784&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:29045784&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td colspan=&quot;2&quot;&gt;&amp;nbsp;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 01 May 2024 07:27:20 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA at 12:58, 15 November 2023</title>
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			<pubDate>Wed, 15 Nov 2023 12:58:00 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<pubDate>Wed, 29 Aug 2018 07:47:47 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:11, 15 November 2017</title>
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			<pubDate>Wed, 15 Nov 2017 10:11:17 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA at 06:12, 1 November 2017</title>
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Authors: Rozeboom, H&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;J&lt;/del&gt;., &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Janssen&lt;/del&gt;, &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;D&lt;/del&gt;.&lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;B&lt;/del&gt;.&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Metal-dependence of xylose isomerase from Piromyces sp&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;E2 explored by activity profiling and protein crystallography&lt;/ins&gt;.,&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Lee M&lt;/ins&gt;, &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Rozeboom HJ, de Waal P, de Jong R, Dudek HM, Janssen DB Biochemistry&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;2017 Oct 18&lt;/ins&gt;. &lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;doi: 10.1021/acs.biochem.7b00777. PMID:29045784&amp;lt;ref&amp;gt;PMID:29045784&amp;lt;/ref&amp;gt;&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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&lt;tr&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;-&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #ffa; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;[[Category: &lt;del style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;Unreleased Structures&lt;/del&gt;]]&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;td class='diff-marker'&gt;+&lt;/td&gt;&lt;td style=&quot;background: #cfc; color:black; font-size: smaller;&quot;&gt;&lt;div&gt;&lt;ins style=&quot;color: red; font-weight: bold; text-decoration: none;&quot;&gt;&amp;lt;/div&amp;gt;&lt;/ins&gt;&lt;/div&gt;&lt;/td&gt;&lt;/tr&gt;
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			<pubDate>Wed, 01 Nov 2017 06:12:52 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA at 10:32, 27 April 2017</title>
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			<pubDate>Thu, 27 Apr 2017 10:32:23 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA: Protected &quot;5nhe&quot; [edit=sysop:move=sysop]</title>
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			<pubDate>Wed, 05 Apr 2017 10:08:14 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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			<title>OCA: New page: '''Unreleased structure'''  The entry 5nhe is ON HOLD   Authors: Rozeboom, H.J., Janssen, D.B.  Description: Crystal structure of xylose isomerase from Piromyces E2 in complex with two Cd2...</title>
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			<description>&lt;p&gt;New page: '''Unreleased structure'''  The entry 5nhe is ON HOLD   Authors: Rozeboom, H.J., Janssen, D.B.  Description: Crystal structure of xylose isomerase from Piromyces E2 in complex with two Cd2...&lt;/p&gt;
&lt;p&gt;&lt;b&gt;New page&lt;/b&gt;&lt;/p&gt;&lt;div&gt;'''Unreleased structure'''&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
The entry 5nhe is ON HOLD &lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
Authors: Rozeboom, H.J., Janssen, D.B.&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
Description: Crystal structure of xylose isomerase from Piromyces E2 in complex with two Cd2+ ions and xylose&lt;br /&gt;
[[Category: Unreleased Structures]]&lt;br /&gt;
[[Category: Janssen, D.B]]&lt;br /&gt;
[[Category: Rozeboom, H.J]]&lt;/div&gt;</description>
			<pubDate>Wed, 05 Apr 2017 10:08:13 GMT</pubDate>			<dc:creator>OCA</dc:creator>			<comments>http://52.214.119.220/wiki/index.php/Talk:5nhe</comments>		</item>
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